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アイテム
魚類インスリン精製のための競合酵素免疫測定法の開発
https://fra.repo.nii.ac.jp/records/2001656
https://fra.repo.nii.ac.jp/records/2001656e0f21f36-5986-4637-bdcb-c8a3212aaacf
| Item type | 紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1) | |||||||||||||||||
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| 公開日 | 2024-04-08 | |||||||||||||||||
| タイトル | ||||||||||||||||||
| タイトル | 魚類インスリン精製のための競合酵素免疫測定法の開発 | |||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||
| タイトル | ||||||||||||||||||
| タイトル | Competitive enzyme immunoassay using antiserum against mammalian insulin for monitoring the purification of fish insulins | |||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||
| 言語 | ||||||||||||||||||
| 言語 | eng | |||||||||||||||||
| 資源タイプ | ||||||||||||||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 | |||||||||||||||||
| 資源タイプ | departmental bulletin paper | |||||||||||||||||
| アクセス権 | ||||||||||||||||||
| アクセス権 | metadata only access | |||||||||||||||||
| アクセス権URI | http://purl.org/coar/access_right/c_14cb | |||||||||||||||||
| 著者 |
安藤, 忠
× 安藤, 忠
× 長澤, 寛道
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| 抄録 | ||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||||||||||
| 内容記述 | We have developed a competitive enzyme immunoassay (EIA) system for monitoring the purification process of fish insulin from Brockmann body extracts using high performance liquid chromatography (HPLC). This EIA system used a horseradish peroxidase-insulin complex as a labeled hormone and 3-(p-hydroxyphenyl) propionic acid as a fluorescent substrate of peroxidase. The specificity of this EIA was proved by the facts that no cross-reactions were detected with mammalian pancreatic hormones except for insulin. The minimal detectable amount in this EIA system was 12 pg/well for bovine insulin, and the sensitivity was higher than those of the systems previously developed for measuring mammalian insulin. Walleye pollock (Theragra chalcogramma) insulins were detected in HPLC fractions by this EIA system. Although we purified walleye pollock insulins from only 230 mg Brockmann bodies, we could obtain enough to analyze the amino acid sequence. The results indicate that the sensitivity of this EIA system is sufficiently high for small-scale purification of fish insulin. However, the estimated amounts of walleye pollock insulins by this EIA system were considerably lower than the assumed amounts from their ultraviolet absorbance. These low cross-reactivities against anti-mammalian insulin antiserum may be due to the differences in the insulin structures of between fish and bovine. | |||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||
| 抄録 | ||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||||||||||
| 内容記述 | 抗ウシインスリン抗血清を使用して魚類インスリンを特異的に検出できる競合酵素免疫測定法を開発した。本方法は、4℃では一年以上活性を維持するペルオキシダーゼとウシインスリンの複合体を標識ホルモンとして、またペルオキシダーゼの発色基質に蛍光基質の3-(p-hydroxyphenyI)propionic acidを使用した。この測定法ではインスリン以外の哺乳類膵臓ホルモン、還元されたウシインスリンA鎖およびB鎖との反応は認められなかった。スケトウダラのブロックマン小体の酸エタノール抽出物を逆相クロマトグラフィーにかけて得られたフラクションについて、本方法でインスリン免疫陽性を示すものをスクリーニングした。免疫陽性反応が認められたフラクションについてアミノ酸配列解析を行った結果、インスリンが含まれており、この測定法の特異性が確かめられた。本法によるウシインスリンの検出下方限界は12pg/ウェルであり、すでに報告されている哺乳類用の放射免疫測定法よりも高感度であった。しかしながら、スケトウダラブロックマン小体抽出物のクロマトグラフィーの各フラクションの測定値は吸光値からの推定インスリン量よりもかなり小さかった。このことは哺乳類インスリンと魚類インスリンのアミノ酸配列の違いによるものと考えられる。 | |||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||
| 書誌情報 |
ja : 北海道区水産研究所研究報告 en : Bulletin of the Hokkaido National Fisheries Research Institute 巻 61, p. 17-26, ページ数 10, 発行日 1997-03 |
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| 出版者 | ||||||||||||||||||
| 出版者 | 北海道区水産研究所 | |||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||
| 出版者 | ||||||||||||||||||
| 出版者 | Hokkaido National Fisheries Research Institute | |||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||
| ISSN | ||||||||||||||||||
| 収録物識別子タイプ | PISSN | |||||||||||||||||
| 収録物識別子 | 0513-2541 | |||||||||||||||||
| 書誌レコードID | ||||||||||||||||||
| 収録物識別子タイプ | NCID | |||||||||||||||||
| 収録物識別子 | AN1015410X | |||||||||||||||||
| 情報源 | ||||||||||||||||||
| 識別子タイプ | Local | |||||||||||||||||
| 関連識別子 | hnf_k_61_17 | |||||||||||||||||
| 関連サイト | ||||||||||||||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||||||||||||||
| 関連識別子 | https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2010560439 | |||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||
| 関連名称 | 日本農学文献記事索引(agriknowledge) | |||||||||||||||||
