マダイおよびベステルのビデロジェニンに関する研究

藤井, 一則

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アイテム

マダイおよびベステルのビデロジェニンに関する研究

https://fra.repo.nii.ac.jp/records/2002397

Item type

紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1)

公開日

2024-04-22

タイトル

マダイおよびベステルのビデロジェニンに関する研究

言語

タイトル

Studies on Vitellogenin in Red Sea Bream and Bester

言語

jpn

キーワード

言語

主題Scheme

Other

主題

red sea bream; sturgeon; bester; vitellogenin; maturation

資源タイプ

資源タイプ識別子

http://purl.org/coar/resource_type/c_6501

資源タイプ

departmental bulletin paper

アクセス権

open access

アクセス権URI

http://purl.org/coar/access_right/c_abf2

著者

藤井, 一則

抄録

内容記述タイプ

Abstract

内容記述

Vitellogenin (Vg), a female-specific protein found in serum of fish with developing oocytes, is a precursor to egg yolk proteins that provide nutrients during early stage development. The objective of this study was to improve artificial propagation of red sea bream, Pagrus major, and the bester, a hybrid sturgeon cross between female Huso huso and male Acipenser ruthenus. (1) Two specific proteins were identified in sera from vitellogenic red sea bream females. These proteins showed female specificity, estrogen (E2) inductivity, and antigenic similarity to major egg yolk proteins. Consequently, both of the proteins were confirmed as Vg. (2) The red sea bream Vgs were purified by hydroxylapatite chromatography followed by gel filtration chromatography. (3) A single radial immunodiffusion method (SRID) was. developed for the quantification of red sea bream Vgs using antiserum against red sea bream egg yolk proteins. The sensitivity range of the SRID was 20.7 µl/ml to 42.4 mg/ml of Vgs with 1 day incubation on a 1% antiserum plate. (4) In vivo effects of E2 on Vg synthesis were investigated in red sea bream. Vg synthesis by hepatocytes was found to be dependent upon dose and time of E2 administration. (5) Vitellogenin in serum of female red sea bream was first detected when oocytes reached the latter part of the primary yolk stage (from mid-December to late January). From that point on, serum Vg levels increased during oocyte growth, reaching a maximum level (2.75 mg/ml) in the spawning season (April). (6) Two red sea bream Vg cDNA fragments, 855 and 3,539 base-pairs, were cloned and sequenced. Both cDNAs encoded unique protein, each which appeared to be carboxyl-terminal fragments of Vgs. (7) Serum Vg of female bester was first detected by SRID when the most mature oocytes of the female reached 0.9 mm in diameter. Serum Vg levels increased during oocyte growth, sharply decreased when oocytes reached 2.9 mm in diameter, and increased again when oocytes became over-ripe. The increase of Vg is thought to be caused by re-absorption of egg yolk proteins. (8) The concentration of serum Vg, the oocyte germinal vesicle position, body weight, and in vitro oocyte maturation response to progesterone can be used as maturational indicators for female bester propagation. (9) Artificial spawning of bester was successfully induced for the first time in Japan by selecting female using Vg as a maturational predictor of ovarian development.

言語

抄録

内容記述タイプ

Abstract

内容記述

1. 成熟マダイ雌血清中に,雄血清中には見られない2種類のタンパク質の存在が確認され,E2投与による発現誘導,分子量,卵黄タンパク質との共通抗原性等から,何れもがビテロジェニンであると考えられた。2. マダイのビテロジェニンを,pH9.0 のリン酸カリウム緩衝液を用いたヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィーおよびゲルろ過クロマトグラフィーにより精製した。3. マダイビテロジェニンの定量法として,放射免疫拡散法を確立した。本法では,プレートに添加する抗血清の濃度を調整することにより,ビテロジェニン濃度10.4 μg/ml~42.4 mg/ml の範囲で定量が可能であった。4. エストロゲン(E2)投与によるマダイのビテロジェニン産生を調べた。E2投与後1日目から検出された血清中のビテロジェニンは,経時的に濃度が増加し,10日目には84.1 mg/ml に達した。5. マダイの卵黄形成過程における血清ビテロジェニン量の変化を調べた。血清ビテロジェニンは,卵母細胞が第一次卵黄球期の後期あるいは第二次卵黄球期の初期に達した時点(12月中旬から1月下旬)から検出され始めた。血清ビテロジェニン量は,卵黄形成の進行に伴い増加し,自然排卵が確認された4月上旬には2.75 mg/ml に達した。6. E2 を投与したマダイの肝臓から,855塩基対(PMVG-1)および3,539塩基対(PMVG-2)の2種類のビテロジェニン cDNA をクローニングし,その構造を解析した。7. ベステルの血清ビテロジェニンは,卵巣卵径が0.9mm に達した時点から検出され始め,卵径2.7mmまでは増加し,2.9mmで一旦減少した後,再度増加した。ベステルの卵黄形成は卵径2.9mmで終了し,以後の増加は過熟卵の再吸収による血清中の卵黄タンパク質によることが強く示唆された。8. ベステルの卵巣卵の卵核胞位置(GVP)を1~5までに数値化し,卵径や血清ビテロジェニン量の変化に伴い,値が有意に変化することを明らかにした。また,GVP が3以上に達した時点で卵黄形成期が終了し,成熟に向かう卵核胞移動期に入ることが示唆された。9. ベステルの種苗生産において,体重の増加,卵巣卵のプロゲステロン感受性および血清ビテロジェニンを指標とすることで,種苗生産に好適な雌親魚を選別出来ることが明らかとなった。卵黄形成を終了し,血清ビテロジェニン量が1mg/ml 以下に急減した雌から得られた卵を種苗生産に用いた場合に,最も高い受精率およびふ化率を示した。

言語

bibliographic_information

ja : 瀬戸内海区水産研究所研究報告
en : Bulletin of Fisheries and Environment of Inland Sea

巻 2, p. 1-48, ページ数 48, 発行日 2000-03

出版者

瀬戸内海区水産研究所

言語

出版者

National Research Institute of Fisheries and Environment of Inland Sea

言語

item_10002_source_id_9

収録物識別子タイプ

PISSN

収録物識別子

1344-8579

item_10002_source_id_11

収録物識別子タイプ

NCID

収録物識別子

AA1138042X

情報源

識別子タイプ

Local

Versions

Ver.1

2024-04-22 08:12:26.011420

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