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アイテム
モノクローナル抗体を用いたChattonella属藻類の識別に関する研究
https://fra.repo.nii.ac.jp/records/2003222
https://fra.repo.nii.ac.jp/records/2003222f278d4f5-83be-4c55-8772-63e608b56a5e
| Item type | 紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1) | |||||
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| 公開日 | 2024-04-25 | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | モノクローナル抗体を用いたChattonella属藻類の識別に関する研究 | |||||
| 言語 | ja | |||||
| タイトル | ||||||
| タイトル | An Identification of Genus Chattonella by Means of Monoclonal Antibodies | |||||
| 言語 | en | |||||
| 言語 | ||||||
| 言語 | jpn | |||||
| キーワード | ||||||
| 言語 | en | |||||
| 主題Scheme | Other | |||||
| 主題 | Monoclonal antibody; Red tide, Immunoassay; Chattonella marina; Chattonella antiqua; Gymnodinium nagasakiense | |||||
| 資源タイプ | ||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 | |||||
| 資源タイプ | departmental bulletin paper | |||||
| アクセス権 | ||||||
| アクセス権 | metadata only access | |||||
| アクセス権URI | http://purl.org/coar/access_right/c_14cb | |||||
| 著者 |
長崎, 慶三
× 長崎, 慶三 |
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| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | Chattonella marina and C. antiqua (Raphidophyceae) are the major red tide organisms in the coastal waters of Japan, and they often damage cultured yellowtails, sea breams and so on. Though it is important to identify the causative algae in biological and ecological studies of red tides, the morphological identification of them has been very difficult. Because these organisms show variety in cell size, and lack rigid cell walls, their shapes can easily change according to environmental conditions. Therefore, many of the Chattonella strains isolated from red tide regions remain unidentified. We have approached this problem by the use of the immunological technique, preparing specific monoclonal antibodies to the organisms. In this study, identification of red tide algae C. marina and C. antiqua by means of monoclonal antibodies is discussed. Seven kinds of monoclonal antibodies (MR-17a, MR-17b, MR-17c, MR-18, MR-21, AT-83 and AT-86) reactive with the cell surface of genus Chattonella were obtained by the use of the hybridoma technique. Indirect fluorescent immunoassay and dot-immunoassay were used to examine the reactivity of each antibody against various strains of genus Chattonella. Four kinds of monoclonal antibodies showed highly species-specific reactivity, i.e. MR-17a, MR-17b and MR-18 were specifically reactive with C. marina, but not with C. antiqua, and AT-86 was specifically reactive with C. antiqua, but not with C. marina. Comparing the reaction spectrum of each strain to the seven kinds of monoclonal antibodies, eighteen strains, which had been morphologically identified as genus Chattonella, could be divided into six groups. It was notable that C. marina and C. antiqua were divided into two groups, respectively. Especially, two strains of C. marina obtained from Kagoshima Bay especially showed different reaction spectra from those obtained from the Seto Inland Sea region. The monoclonal antibody technique was also applied to the live samples. Dealing with the samples obtained from red tide regions of Akashi and Buzen, it was shown that this method could also be applied to the live samples. But it was very important to examine as fresh samples as possible. Western-blotting method, dot-immunoassay, competitive enzyme-linked immunosorbent assay and im- muno-electron microscopy were used to characterize the antigenic determinants (epitopes) recognized by MR-18, MR-21 and AT-86. All the antibodies recognized several kinds of molecules by the Western-blotting method. In spite of their high stability to heat-treatment and pronase-treatment, drastic degradation of antigenicities was caused by periodate-treatment in each case. Electron microscopic observation revealed that the antigens were located not only on the cell surfaces but also at the inner membrane systems. Therefore, it was strongly suggested that these antibodies recognized glycoproteins, and antigenic determinants might be located in the carbohydrate side chains. The monoclonal antibody technique was also applied to genus Gymnodinium. A monoclonal antibody GN-89 was obtained, which was specifically reactive with the cell surface of G. nagasakiense in the coastal seas of Japan. But it was not reactive with G. breve, G. catenatum, and a north-European species, G. cf. nagasakiense (Gyrodinium cf. aureolum). From the results of this study, it was shown that the monoclonal antibody technique was useful for an inter- and intra-species identification of red tide algae, and identification of genus Chattonella was highly clarified. | |||||
| 言語 | en | |||||
| 抄録 | ||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||
| 内容記述 | 日本沿岸海域における赤潮の原因生物の代表種として知られる Chattonella 属藻類は,その発生類度およびもたらす被害の大きさから,現在も多くの研究者の研究対象となっている。しかるにあらゆる研究を行う上での共通の定規たるべき本属藻類の分煩体系は,現在に至るまで多くの混乱を伴ってきた。これは,本属藻類が形態学的に多様であるにも関わらず、もっぱら形態学的特徴に基づく識別·同定が行われてきたことによると考えられる。本研究は,モノクローナル抗体のもつ反応特異性を利用することにより,本属藻類の免疫学的側面からの識別を行った結果をとりまとめたものである。以下にその主な内容を示した。Chattonella 属藻類の細胞表面に特異的に反応する7種のモノクローナル抗体を作製し,各抗体の Chattonella 属18株に対する反応性を間接蛍光抗体法およびドットイムノアッセイ法により調べた。各株の反応バターンを比較することにより,18株を6グループに分けることができた。C. marina および C.antiquaの2種はそれぞれ2グループに分けられた。なかでも,C.marinaは瀬戸内海産のグループと鹿児島湾産のグループに分けられ,免疫学的手法による分類の結果と地理的分布圏とが一致する結果となった。また、本法の現場海水中試料に対する応用も可能であることが示されたが,現場の藻相をより正確に結果に反映させるためにサンプリング後できるだけ迅連に測定を行う必要があると考えられた。本法の方法論としての信頼性を得るために,得られた7抗体のうち3抗体の認識抗原について性状解析を行った結果,いずれも糖タンパク質の糖鎖部分を認識している可能性が強く示唆された。したがって,本法で用いたモノクローナル抗体による識別の根挺となっているのは,藻体のもつ多糖構造の差であると考えられた。また,同様のアプローチをGymnodinium属に対して試みることにより,本法が赤潮藻研究に 普遍的に応用できることを示した。得られた抗体GN-89 は,日本沿岸海域に由来する G. nagasakiense に対して特異的に反応したが、G. breve, G. catenatum および欧州北海産 G. cf. nagasakiense に対しては反応しなかった。 | |||||
| 言語 | ja | |||||
| bibliographic_information |
ja : 南西海区水産研究所研究報告 en : Bulletin of Nansei National Fisheries Research Instituite 巻 26, p. 133-190, ページ数 58, 発行日 1993-03 |
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| 出版者 | ||||||
| 出版者 | 南西海区水産研究所 | |||||
| 言語 | ja | |||||
| 出版者 | ||||||
| 出版者 | Nansei National Fisheries Research Instituite | |||||
| 言語 | en | |||||
| item_10002_source_id_9 | ||||||
| 収録物識別子タイプ | PISSN | |||||
| 収録物識別子 | 0388-841X | |||||
| item_10002_source_id_11 | ||||||
| 収録物識別子タイプ | NCID | |||||
| 収録物識別子 | AN00181988 | |||||
| 情報源 | ||||||
| 識別子タイプ | Local | |||||
| 関連識別子 | nnf_k_26_133 | |||||
| 関連サイト | ||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||
| 関連識別子 | https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2010501880 | |||||
| 言語 | ja | |||||
| 関連名称 | 日本農学文献記事索引(agriknowledge) | |||||
