WEKO3
アイテム
コイ上皮性細胞株，Epithelioma Papulosum Cyprini (EPC)への優性選択マーカー遺伝子pSV2neoの導入
https://fra.repo.nii.ac.jp/records/2007621
https://fra.repo.nii.ac.jp/records/200762105b868f8-54c5-453b-aabd-646cc464d9cc
| アイテムタイプ | 紀要論文 / Departmental Bulletin Paper(1) | |||||||||||||||||||||||
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| 公開日 | 2024-06-18 | |||||||||||||||||||||||
| タイトル | ||||||||||||||||||||||||
| タイトル | Transfection of the Dominant Selective Marker, pSV2neo, into a Fish Cell Line Epithelioma Papulosum Cyprini (EPC) | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||||
| タイトル | ||||||||||||||||||||||||
| タイトル | コイ上皮性細胞株，Epithelioma Papulosum Cyprini (EPC)への優性選択マーカー遺伝子pSV2neoの導入 | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | ||||||||||||||||||||||||
| 言語 | eng | |||||||||||||||||||||||
| キーワード | ||||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||||
| 主題Scheme | Other | |||||||||||||||||||||||
| 主題 | cultured cells; EPC cell line; fish, pSV2neo; transfection | |||||||||||||||||||||||
| 資源タイプ | ||||||||||||||||||||||||
| 資源タイプ識別子 | http://purl.org/coar/resource_type/c_6501 | |||||||||||||||||||||||
| 資源タイプ | departmental bulletin paper | |||||||||||||||||||||||
| アクセス権 | ||||||||||||||||||||||||
| アクセス権 | metadata only access | |||||||||||||||||||||||
| アクセス権URI | http://purl.org/coar/access_right/c_14cb | |||||||||||||||||||||||
| 著者 |
荒木, 和男
× 荒木, 和男
WEKO
1769
× 名古屋, 博之
WEKO
1903
× 小野里, 坦
WEKO
4252
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| 抄録 | ||||||||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||||||||||||||||
| 内容記述 | The synthetic plasmid, pSV2neo, was transfected into a fish epithelium cell line (EPC) by calcium phosphate, electroporation, protoplast fusion and DEAE-dextran methods, which are used for mammalian cultured cells, to determine the optimum transfection method applicable for cultured fish cells. The efficiency of transfection was estimated by counting the number of colonies of stable transformants in a selection medium. 42, 26, and 21 transformants/5×10⁶ cells per 30 μg plasmid DNA were obtained by the calcium-phosphate, electroporation, and protoplast fusion methods, respectively. Southern hybridization indicated that the isolated stable transformants had a complete neo gene associated with the promoter and enhancer of SV40. These results suggest that pSV2neo was successfully integrated into the genome of the host fish cells by these methods and that the early promoter and enhancer region of SV40 can function in cultured fish epithelium cells. | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||||
| 抄録 | ||||||||||||||||||||||||
| 内容記述タイプ | Abstract | |||||||||||||||||||||||
| 内容記述 | 魚類培養細胞に適用可能な遺伝子導入法を見いだすことを目標に,哺乳類培養細胞に適用されているリン酸カルシウム法、DEAE-デキストラン法,プロトプラスト融合法,エレクトロポレーション法を用いて,コイ上皮細胞株 EPCへの遺伝子導入を試みた。導入する遺伝子としては,ジェネティシン耐性遺伝子をもつ合成プラスミドpSV2neo を用いた。EPC 細胞への遺伝子導入効率は,選択培地内でジェネティシン耐性形質を獲得した1個の安定形質転換体が増殖し形成したと考えられるコロニー数を指標にして示した。30μgのプラスミドDNAを用いてリン酸カルシウム法,エレクトロポレーション法及びプロトプラスト融合法により遺伝子の導入を行った場合,5×10⁶個のEPC 細胞あたり平均して,それぞれ,42個,26個,21個の安定形質転換体のコロニーが形成された。サザンハイブリダイゼーションを行った結果,単離した安定形質転換体は SV40 のエンハンサーとプロモーターをもつ完全な形のneo遺伝子をゲノム内に持つことが判明した。これらの結果から,pSV2neo プラスミド遺伝子が用いた方法のうちの3種類の方法によってEPC細胞のゲノム内に導入されること,EPC 細胞内で SV40 の発現調節領域が正常に働き,neo 遺伝子の発現がもたらされることが明らかとなった。 | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||||||||
| 書誌情報 |
ja : 養殖研究所研究報告 en : Bulletin of National Research Institute of Aquaculture 巻 20, p. 1-9, ページ数 9, 発行日 1991-11-30 |
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| 出版者 | ||||||||||||||||||||||||
| 出版者 | 養殖研究所 | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||||||||
| ISSN | ||||||||||||||||||||||||
| 収録物識別子タイプ | PISSN | |||||||||||||||||||||||
| 収録物識別子 | 0389-5858 | |||||||||||||||||||||||
| 書誌レコードID | ||||||||||||||||||||||||
| 収録物識別子タイプ | NCID | |||||||||||||||||||||||
| 収録物識別子 | AN00245945 | |||||||||||||||||||||||
| 情報源 | ||||||||||||||||||||||||
| 識別子タイプ | Local | |||||||||||||||||||||||
| 関連識別子 | nria_k_20_1 | |||||||||||||||||||||||
| 関連サイト | ||||||||||||||||||||||||
| 関連タイプ | isIdenticalTo | |||||||||||||||||||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||||||||||||||||||||
| 関連識別子 | https://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2010501928 | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||||||||
| 関連名称 | 日本農学文献記事索引 | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | en | |||||||||||||||||||||||
| 関連名称 | agriknowledge | |||||||||||||||||||||||
| 関連サイト | ||||||||||||||||||||||||
| 関連タイプ | isSupplementedBy | |||||||||||||||||||||||
| 識別子タイプ | URI | |||||||||||||||||||||||
| 関連識別子 | https://fra.repo.nii.ac.jp/records/2015623 | |||||||||||||||||||||||
| 言語 | ja | |||||||||||||||||||||||
| 関連名称 | 養殖研究所研究報告 20号 正誤表 | |||||||||||||||||||||||
